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WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細胞

更新時間:2025-04-09

簡要描述:

細胞名稱:WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細胞
種屬來源:人
性別年齡:女性,年齡未知
組織來源:腎
生長特性:貼壁生長
細胞形態:上皮樣
細胞規格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)
37 ℃, 5% CO2

型號:YZ-X1022點擊量:320
品牌研尊生物貨號YZ-X1022
規格1 X 106cells/T25或1 mL凍存管供貨周期現貨
主要用途科研實驗

 

WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細胞

種屬來源:

性別年齡:女性,年齡未知

組織來源:

生長特性:貼壁生長

細胞形態:上皮樣

細胞規格:1 X 106cells/T251 mL凍存管

培養條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)

          37 , 5% CO2

凍存條件90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1618傳代1-2天傳1

細胞培養操作

干冰運輸收到細胞后需立即轉入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復蘇

常溫運輸收到細胞后,請立即將細胞培養瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養傳代

細胞傳代細胞密度達80% - 90%,即可進行傳代培養

培養瓶中細胞操作步驟

 對于貼壁培養的細胞,寄送前,我們會將培養基充滿整個培養瓶,以減少產品運輸過程中貼壁細胞的脫落。

  1. 收到細胞后,請注意觀察是否有污染。將培養瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細胞脫落漂浮的情況,這些細胞仍是活細胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。

  2. 對于貼壁細胞,在生物安全柜環境中,用真空泵去除培養瓶中多余的培養基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據培養基選擇合適的CO2含量的37恒溫培養箱中培養,擰松瓶蓋。如果細胞已經長滿培養瓶,請立即傳代。

  3. 對于懸浮的細胞,在生物安全柜環境中,轉移培養瓶中的細胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養基吹散細胞,轉移至新的培養瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37恒溫培養箱中培養。

凍存管細胞操作步驟

注意: 為保證細胞的高活率,請收到產品后,立即解凍培養。

  1. 將凍存管置于37水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。

  2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續操作須在生物安全柜中完成。

  3. 將凍存管中的液體轉移到含有5mLwan全培養基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。

  4. wan全培養基重新懸浮細胞并轉移到新的培養瓶中。為保證細胞復蘇的存活率,請將培養基在37水浴預熱后使用。

  5. 將細胞置于含有合適CO2的37恒溫培養箱中培養。

貼壁細胞傳代培養

  1. 吸取并棄掉培養瓶中培養基,加入PBS潤洗一次。

  2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養箱中孵育,直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。

  3. 加入2mLwan全培養基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打將細胞從培養瓶表面吹落,并使細胞分散。

  4. 將細胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養基將細胞重懸,轉移到新的培養瓶中培養。

懸浮細胞傳代可參考以下方法:

一、直接傳代法

  1. 待懸浮細胞長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃),即可傳代;

  2. 吸管吸棄細胞懸液 1 / 2~1 / 3;

  3. 加入適量的新鮮培養基,繼續培養。

     二、離心傳代法(在發現有細胞碎片的情況下)

  4. 將細胞懸液轉移到離心管內;

  5. 150 g 離心 5 min,棄去上層清液;

  6. 使用新鮮的培養基重懸細胞;

  7. 吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養瓶,再加入適量的新鮮培養基,繼續培養。

細胞凍存操作

  1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識

  2. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。

 WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細胞

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